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产品名称 Hoechst 33342染色液
产品类别 常用水试剂 >> 暂未分类
产品简介 Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。
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   Hoechst 33342染色液的详细介绍:

Hoechst 33342染色液

 

产品规格        您的价格

 50ml            350.00

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Hoechst 33342,也称bisBenzimide H 33342或HOE 33342。分子式为C27H28N6O·3HCl·3H2O,分子量为615.99,CAS Number 23491-52-3。
    Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。
    Hoechst 33342染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342也常用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。
    Hoechst 33342的最大激发波长为346nm,最大发射波长为460nm;Hoechst 33342和双链DNA结合后,最大激发波长为350nm,最大发射波长为461nm。
   本Hoechst 33342染色液可用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。 

   

试剂盒组成

规格

保存条件

Hoechst 33342浓缩液(50X

1ml

-20℃避光

Hoechst 33342稀释液

50ml

2-8℃

   

   此染色液做  成浓缩液和稀释液主要是为了使用方便,因为浓缩液才1ml,解冻起来很快,实际也可以一次将浓缩液都加入稀释液中,混匀使用。但如果一次使用量比较少,使用次数比较多,最好是适当分装一下,免得多次冻融。

 

使用说明
    Hoechst 33342染色液染色液的配制:将Hoechst 33342浓缩液取出解冻,轻轻混匀,短时间离心,根据使用量,按照1ml33342稀释液加入20ul33342浓缩液的比例配制,即成Hoechst 33342染色液。此配好的染色液深度为10ug/ml,如果感觉染色颜色比较深,可适当的稀释(用稀释液)。此配好的染色液未用完可存放于-20℃避光。

1. 对于固定的细胞或组织:
   a. 对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33342染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的Hoechst 33342染色。
   b. 对于贴壁细胞或组织切片,加入少量Hoechst 33342染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞,至少加入待染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。
   c. 吸除Hoechst 33342染色液,用TBSTPBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
   d. 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。

2. 对于活细胞或组织
   a. 加入适当量Hoechst 33342染色液,必须充分覆盖住待染色的样品,通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液,对于96孔板一个孔需加入100微升染色液。
   b. 在适宜于细胞培养的温度培养20-30分钟。弃染色液,用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。

 

 

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